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        使用ELISA試劑盒之前,建議多了解一些相關知識

        發布時間: 2021-04-02  點擊次數: 145次
          ELISA試劑盒在國內有許多種叫法:例如:ELISA檢測試劑盒、ELISAKit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒等。本品自從60-70時代問世以來,得到科研工作者的認可及推重,在歐美及我國獲得很大的推廣,尤其是國內生化范疇的長足發展。它是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗確診方法。由于其試劑安穩、易保存,操作簡潔,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學查驗的各范疇中。是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測。
          ELISA試劑盒在實際測定操作中要留意以下幾點:
          一、溫度
          1.試劑盒回溫
          大多數試劑盒為冷藏(2℃-8℃)保存。從冰箱拿出來后,先不要急于翻開試劑盒,要等試劑盒的溫度平衡至室溫且試劑盒盒表面無冷凝水。檢測所用的試劑需充分混勻且溶解后再用。提早1~2小時取出試劑盒,放在室溫中;或在預設25℃恒溫培養箱中平衡30分鐘~60分鐘。
          2.環境溫度的操控
          可采用以下辦法操控溫度:
          1)試驗室應配備溫濕度表,且確保定時計量。
          2)依據天氣情況設定試驗室空調制冷或加溫功能,待室溫安穩且無攪擾的條件下再開端檢測流程。
          3)選用帶溫控設備的孵育儀器,如恒溫孵育器、恒溫培養箱、多功能酶標儀等。留意要提早敞開預熱。
          3.孵育
          孵育時要確保溫度均勻,防止蒸發變干。孵育時運用封板膜,并置于暗處孵育。多塊板一起試驗時,要平放各板,不要疊放,避免溫度擴散的不均勻性或邊緣效應。
          二、加樣
          1.加樣要快速準確,時刻宜操控在15分鐘內。
          2.如樣品量較大,可分次完成試驗,或將測樣液置于預混微孔板中運用多通道移液器快速移取。
          3.汲取同一試劑,可將試劑倒入V型加樣槽中,運用多通道移液器快速移取。
          三、妥善保存
          試劑盒至室溫后,取出要運用的酶標板孔,未運用的酶標板孔應及時放回鋁箔袋,加入干燥劑,封緊封口,2℃-8℃冷藏保存。切忌將未平衡至室溫的酶標板放回鋁箔袋,因為此刻因為溫度差,酶標板上會有水汽,不利于安穩保存。大多數試劑盒加樣后反應時刻較短,環境溫度對檢測成果會有很大影響,所以操控好環境溫度是確保試劑盒檢測成果有用的重要因素。
          此外,這些試驗忌諱,是您萬萬不可觸碰的:
          1、濃洗刷液或許會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗刷時不影響成果。
          2、如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先將樣本稀釋必定倍數(n倍)后再測定,計算時請終乘以稀釋倍數(×5×n)。
          3、各步加樣均應運用加樣器,并常常校正其正確性,以防止試驗誤差。一次加樣時間好控制在5分鐘內,如標本數目多,舉薦運用排槍加樣。
          4、封板膜只限一次性運用,以防止交叉污染。
          5、嚴格按照說明書的操作進行,ELISA試劑盒試驗成果斷定有必要以酶標儀讀數為準。
          6、從冷躲環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可運用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝進密封袋中保存。
          7、所有樣品,洗刷液和各種廢棄物都應按感染物處理。
          8、本試劑不同批號組分不得混用。

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